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Wie findet man die Konzentration der DNA aus der Absorption?
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Video: Wie findet man die Konzentration der DNA aus der Absorption?

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Anonim

DNA-Konzentration wird durch Messung der. geschätzt Absorption bei 260 nm, Einstellen des A260 Trübungsmessung (gemessen durch Absorption bei 320 nm), multipliziert mit dem Verdünnungsfaktor und unter Verwendung der Beziehung, dass ein A260 von 1,0 = 50 µg/ml reine dsDNA.

Ebenso fragen die Leute, wie findet man die Konzentration der DNA?

Um die DNA-Konzentration in der Originalprobe zu bestimmen, führen Sie die folgende Berechnung durch:

  1. dsDNA-Konzentration = 50 μg/ml × OD260 × Verdünnungsfaktor.
  2. dsDNA-Konzentration = 50 μg/ml × 0,65 × 50.
  3. dsDNA-Konzentration = 1,63 mg/ml.

Und was ist eine gute DNA-Konzentration? EIN gut Qualität DNA Probe sollte ein A haben260/EIN280 Verhältnis von 1,7-2,0 und einem A260/EIN230 Verhältnis von mehr als 1,5, aber da die Empfindlichkeit der verschiedenen Techniken gegenüber diesen Verunreinigungen variiert, sollten diese Werte nur als Anhaltspunkt für die Reinheit Ihrer Probe dienen.

Absorbiert DNA auf diese Weise bei 280 nm?

Das Absorptionsverhältnis bei 260 nm vs 280 nm ist häufig verwendet, um zu beurteilen DNA Kontamination von Proteinlösungen, da Proteine (insbesondere die aromatischen Aminosäuren) absorbieren Licht bei 280 nm.

Wie verwenden Sie NanoDrop zur DNA-Konzentration?

Grundsätzlich die Nanotropfen gibt Ihnen die Möglichkeit zu wählen DNA , RNA, Proteine. Sie müssen auswählen DNA , geben Sie dann 2 L Wasser (mili Q bevorzugt) ein, wählen Sie „Leer“danach geben Sie weitere 2 ΜL Wasser ein, um zu bestätigen, dass das Maß 0 ist. Geben Sie dann 2 ΜL Ihrer Probe ein. Sie erhalten das Maß.

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