Was dient üblicherweise als DNA-Klonierungsvektor?
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Video: Was dient üblicherweise als DNA-Klonierungsvektor?

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Video: Was ist der Unterschied zwischen einem mRNA- & einem Vektor-Impfstoff? SCIENCE IN A MINUTE by SSPH+ 2024, November
Anonim

Es gibt viele Arten von Klonen von Vektoren , aber am meisten häufig die verwendeten sind gentechnisch veränderte Plasmide. Klonen wird im Allgemeinen zuerst mit Escherichia coli durchgeführt, und Klonen von Vektoren in E. coli umfassen Plasmide, Bakteriophagen (wie Phagen λ), Cosmide und bakterielle künstliche Chromosomen (BACs).

Auch gefragt, was ist ein Vektor beim DNA-Klonieren?

Im molekularen Klonen , ein Vektor ist ein DNA Molekül, das als Vehikel verwendet wird, um fremdes genetisches Material künstlich in eine andere Zelle zu transportieren, wo es repliziert und/oder exprimiert werden kann (z. B. Plasmid, Cosmid, Lambda-Phagen). EIN Vektor ausländische enthalten DNA wird als rekombinant bezeichnet DNA.

Wissen Sie auch, wie Sie einen Vektor klonen? Versuchsdurchführung

  1. Führen Sie eine PCR durch und reinigen Sie das PCR-Produkt: Führen Sie eine PCR aus, um Ihre Insert-DNA zu amplifizieren.
  2. Verdaue deine DNA:
  3. Isolieren Sie Ihr Insert und Ihren Vektor durch Gelreinigung:
  4. Ligieren Sie Ihre Einfügung in Ihren Vektor:
  5. Transformation:
  6. Isolieren Sie das fertige Plasmid:
  7. Überprüfen Sie Ihr Plasmid durch Sequenzierung:

Wie funktioniert pBR322 in dieser Hinsicht als Klonierungsvektor?

pBR322 Plasmid pBR322 war eines der ersten Plasmide, das zum Zwecke der Klonen . Es enthält Gene für die Resistenz gegen Tetracyclin und Ampicillin. Insertion der DNA an spezifischen Restriktionsstellen kann inaktivieren das Gen für Tetracyclin (ein Effekt, der als Insertionsinaktivierung bekannt ist) oder Ampicillinresistenz.

Mit welcher Technik lassen sich sehr schnell viele Kopien eines bestimmten DNA-Abschnitts herstellen?

Polymerase Kettenreaktion

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